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国民党二届三中全会是武汉反蒋运动最精彩的一幕。表面观之，胜利无疑属于武汉，然而这一局面未能维持多久。三中全会之后，蒋介石不再掩饰他的反共决心，并加快了他的反共步伐。三中全会闭幕后不到一个月，蒋介石即发动了“四一二”清党运动，紧接着在南京另立国民政府，与武汉分庭抗礼。
武汉方面获悉蒋介石发动“四一二”政变的消息后，于15日召开国民党中央常务委员会扩大会议，会议决定开除蒋介石党籍，免去其本兼各职，按反革命罪条例惩治。会后，40位国民党中央委员、国民政府委员和军事委员会委员联名发表通电，谴责蒋介石自立中央的行为。但武汉政府在政治声讨之余，对是否向南京政府发动军事征讨，意见不一。一派主张东征讨蒋，一派主张北伐讨奉。东征则担心奉军南犯，北伐又顾虑蒋军来攻。两派不同的意见，不仅存在于武汉国民党领导人之间，也存在于苏俄顾问、共产国际代表和中国共产党人之间。如鲍罗廷与加伦以及刚来中国的共产国际执委罗易之间即存有分歧。经过反复论辩，最后北伐的主张占居上风，决定先肃清在河南的张作霖部队，把冯玉祥的西北军接出来，将对付张作霖于京汉线上的责任托付给冯玉祥，然后再专力东征讨蒋。当时，冯玉祥的西北军号称30万人，认为是一支可以和奉系匹敌的力量。此外，阎锡山的10余万军队也有可能争取过来。鉴此，武汉政府毅然决定北伐。